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泥鳅为底栖鱼类，喜生活于有底淤泥的静水或缓和流水域中，如湖泊、池塘、稻田、沟渠、水库等，喜中性或偏酸性的黏性土壤，适宜的生活水温为10-32℃，适水温为22-28℃；当水温在10℃以下或30℃以上时，泥鳅活动明显减弱；水温低于5℃或35℃以上时，就潜入泥中停止活动。冬季，泥鳅钻入淤泥20-30厘米处越冬，到第二年春天，水温达10℃以上时，才出来活动。
泥鳅卵圆形，直径0.8毫米左右，成熟卵受精后在水中吸水迅速膨胀，半小时左右,卵径增大到1.3毫米，几乎完全透明,泥鳅卵弱黏性。卵球分化有动物极和植物极。
孵化将附有卵粒的鱼巢放在池中，密度要适宜。如果是静水池塘，需要充气，以孵化时所需的充足的溶氧。充气量大小与卵质密度有关，如鱼巢放置密度较稀，卵质好，则充气量小；反之，充气量要大。
泥鳅除了用鳃呼吸外，还能进行肠呼吸，所以它对低溶氧的忍耐力很强。在缺水的环境中，只要泥土保持湿润，泥鳅仍可存活很长时间。泥鳅对环境的适应性很强，因而在鳅科100余种鱼类中，唯泥鳅数量多，分布广。
由于泥鳅取食广泛，所以与其他鱼类混养往往能起到“清洁工”的作用。泥鳅白天大多潜伏在泥中，喜上半夜外出觅食，如果环境安静，有时白天也出来活动。
泥鳅一般2龄时开始性成熟。其繁殖季节是4-9月，6-7月为繁殖盛期。通常情况，19℃以上开始产卵，24℃左右产卵量大，繁殖活动强烈。
